Oligo(dT)磁珠是一款用于杂交提取mRNA超顺磁单分散的磁珠,其表面共价偶联了寡聚dT序列,利用磁珠表面的寡聚dT序列可以和mRNA的polyA尾之间的碱基配对,可以从真核总RNA或者细胞、动植物组织中快速分离高纯度完整mRNA。所分离的mRNA可以直接用于分子生物学中的大多数下游应用:RT-PCR、固相cDNA文库构建、S1核酸酶分析、核糖核酸酶保护分析、引物延伸、点杂交和槽杂交、体外扩增实验、RACE、消减杂交。Northern分析、基因克隆和基因表达分析。由于低聚物dT与磁珠表面共价结合特性,因此Bio Mag Beads oligo(DT)可以重复使用(原则上不建议回收反复利用,以避免交叉污染和影响下游实验)。
二、产品描述:
配体
|
Oligo(dT)
|
磁珠表层材料
|
超顺磁亲水高分子磁珠
|
包装
|
2ml、10ml
|
粒径大小
|
1μm
|
浓度
|
5mg/ml
|
结合量
|
≈5μg的mRNA/10mg磁珠
|
|
|
建议pH使用范围
|
1-9
|
沉降系数
|
2mg/ml磁珠在60ul以下体积沉降时间应该不大于10s
|
磁珠保存液
|
10mM PBS, 0.09%sodium azide,pH=7.4。
|
保存
|
4℃,禁止冷冻,使用前请充分混匀
|
批号
|
Lot:
|
保存期
|
2-8℃保存,保质期三年,请于 年 月 日前使用。
|
注意事项
1.所有buffer在使用前要预冷到2-8℃。
2.要保证磁珠分散在溶液中,严禁磁珠干燥,会影响磁珠的分散和结合能力。
3.磁吸附后移除上清的步骤,必须完全移除掉所有上清。
4.我们建议提取到的mRNA立即用于RT-PCR。如果需要保存,建议洗脱液中添加RNase抑制剂,将mRNA从磁珠上洗脱下来并且冻存
5.避免污染,在操作过程中请佩戴一次性手套,避免接触其他污染物,并且建议多次更换手套,所有用于mRNA提取的buffer和耗材都应该是无核糖核酸酶的。
三、缓冲液配制
Binding Buffer
|
20 mM Tris-HCl, pH 7.5, 1.0 M LiCl, 2 mM EDTA.
|
Lysis/Binding Buffer
|
100 mM Tris-HCl, pH 7.5, 500 mM LiCl, 10 mM EDTA, 1% LiDS, 5 mM dithiothreitol (DTT),如果发现沉淀,加热并且摇动溶解至澄清。
|
Washing Buffer A
|
10 mM Tris-HCl, pH 7.5, 0.15 M LiCl, 1 mM EDTA, 0.1% LiDS.
|
Washing Buffer B
|
10 mM Tris-HCl, pH 7.5, 0.15 M LiCl, 1 mM EDTA 10 mM Tris-HCl, pH 7.5.
|
注:如果提取后的mRNA不马上使用,请在洗脱液中添加RNase抑制剂,冷冻保存。
留言咨询
|
![](image/erweima.jpg) |
生物纳米材料前沿 |
![](image/2wei.jpg) |
纳米医学Frontier |
|
温馨提示:苏州北科纳米供应产品仅用于科研,不能用于人体,不同批次产品规格性能有差异。网站部分文献案例图片源自互联网,图片仅供参考,请以实物为主,如有侵权请联系我们立即删除。 |